灵芝母种制作技术
回答:使用马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml配制培养基,马铃薯去皮后切块洗净,加水1000毫升,文火煮沸30分钟后过滤取汁,将琼脂放入液体内文火煮沸,不断搅拌至溶解,培养基煮好后趁热分装试管,塞上棉塞,包扎塑料薄膜,放入灭菌锅,之后拿出斜放,冷却后即凝固成斜面培养基。
一、准备用品与试剂
主要包括各种营养物质、高压灭菌锅、天平、棉塞、试管(20毫米×200毫米)、稀碱液(1摩尔/升NaOH溶液,即4克氢氧化钠溶于100毫升水)、稀酸液(1摩尔/升盐酸溶液,即84毫升浓盐酸加水916毫升)等。
二、培养基配方
1、马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。
2、马铃薯100g、麸皮100克、蔗糖20g、KH2PO4 1g,MgSO4 0.5g、琼脂20g、水1000ml。
3、马铃薯200g、蔗糖20g、KH2PO4 2g,MgSO4 0.5g、维生素B1 20毫克、琼脂20g、水1000ml。
三、培养基配制
1、马铃薯等块茎、植物根去皮后切块洗净,加水1000毫升,文火煮沸30分钟后过滤取汁,其他各种成分称量要准确,配制过程中葡萄糖要最后加入,灵芝一般要求PH5.5-6,用稀碱1摩尔/升Na〇H、稀酸1摩尔/升HC1来调整酸碱度至适度为止。将琼脂(若为条形需剪短)放入所配液体内,文火煮沸,煮时不断搅拌至溶解。
2、培养基煮好后趁热分装试管,装量为试管长度的四方之一左右,然后塞上棉塞。倾倒时要防止培养基沾污管口,一旦沾上应用纱布擦净。试管要事先洗净,严防油污。棉塞用未脱脂普通棉花,大小、松紧适中,要求与管壁紧贴。
四、灭菌与培养
棉塞端包扎塑料薄膜,放入灭菌锅,经高压灭菌后,除去包扎的薄膜,直立于容器或框架内,使管内水蒸气向外界散发,当温度下降至50℃左右时(取试管1支贴放脸上,很烫但能放得住,约为50℃左右),即可整捆斜放在斜面板上,斜面长度不超过管长的二分之一,冷却后即凝固成斜面培养基。
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