马铃薯组织培养苗真菌污染原因及防治
马铃薯组织培养中,真菌污染比较常见,找准污染原因,做好防治是提高微型薯产量和质量的关键措施。
一、马铃薯组培苗真菌污染的原因
1、培养基污染:可能是灭菌不彻底,封口材料老化、密封性差造成的;
2、组培苗带菌:主要是因为接种材料本身带菌,但前期菌量少未表现出来,接种后菌量富集而污染;
3、接种室或培养室真菌孢子浓度过大;
4、接种器械灭菌不彻底;
5、超净台不洁净。
二、防治马铃薯组培苗真菌污染的措施
1、灭菌前先检查封口材料是否完好,密封性是否强;经常检查灭菌锅的灭菌质量,如有问题应立即检修;灭菌锅内的灭菌材料不能堆放过满,以免影响蒸汽的流通和热交换;冷空气要彻底排放干净,以免导致灭菌锅内的实际温度与压力表上的温度不一致;升降温速度不能太快。
2、继代培养中若有真菌污染应采用30g/L的多菌灵无菌水溶液浸泡半个小时以上,用无菌水冲洗后接种或直接接种。
3、针对接种室或培养室内的真菌孢子浓度过大造成的污染,应采取75%的乙醇溶液定期喷雾降尘,杀灭空气中的孢子,以保持室内清洁。
4、接种器械定期放入灭菌锅内灭菌,接种时要勤换工具以免交叉污染,接种过程中要经常对接种器械进行彻底消毒。
5、定期对超净台进行清理检修。灭菌前超净台内的紫外灯要开30分钟以上,接种时超净台上的空白培养基不能堆放过多,否则造成气流不畅。
6、接种过程中要严格按照操作规程进行,经常用75%的乙醇擦拭双手。
7、接种前仔细检查基础苗是否污染,对挑选来的基础苗容器外壁用75%的乙醇进行彻底消毒。
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